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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
中國倉鼠肺細胞;CHL[Phe2,Orn8]-催產素質量規格：>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin

BxPC-3細胞，人原位胰腺腺癌細胞 人皮膚纖維微細胞系,Malmc細胞 小鼠漿細胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催產素質量規格：>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin

HT-1080(人纖維肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)質量規格：>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)

Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g[Trp4]-Kemptide質量規格：>95%,BR[Trp4]-Kemptide

人髓核細胞裂解物HNPCL（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Coumarin
人胚肺成纖維細胞;MRC-5氧化型輔酶Ⅱshēng huà shì jì容量：RT25克

HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-溴尿嘧啶 5-BroMourccil;5-BroMo-2,4,3H)-pyriMidinqdionq; 21-0-7

NSC，大鼠神經干細胞溴紫葡萄糖肉湯shēng huà shì jì容量：25克

CD38 Others Human 人 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 抗生素Ⅱ號培養基(Ph6.5～6.6)shēng huà shì jì容量：RT25克

大鼠視網膜微血管內皮細胞*培養基 100mLRhamnose 5g/10g/100g 國產
EPHA3 Others Human 人 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛伐他汀二聚體雜質Simvastatin Dimer Impurity質量規格：美國進口

臍靜脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)辛伐他汀，1-芘乙酰酯Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester質量規格：美國進口

JK(Jurkat)細胞，人細胞瘤細胞 615小鼠網織細胞性白血病瘤株,L615細胞 人結腸平滑肌細胞裂解物HCSMCL2,3-脫氫辛伐他汀酸鈉鹽2,3-Dehydro Simvastatin Acid  Salt質量規格：美國進口

NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2脫氫辛伐他汀Dehydro Simvastatin質量規格：美國進口

Calu-3(人肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0062CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株)5×106cells/瓶×2 正常小鼠Leydig細胞;TM36'-羧基辛伐他汀6'-Carboxy Simvastatin質量規格：美國進口
一氧化氮NO含量測定試劑盒HA Others H5N8 甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 水溶毛地黃皂苷質量規格：進分,BRDigitonin-water-soluble

NSC，大鼠神經干細胞DSP質量規格：BRDSP

CD38 Others Human 人 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 羥丙基β環糊精;2-羥丙基-β-環糊精質量規格：>98%,藥用級HPCD

大鼠視網膜微血管內皮細胞*培養基 100mL羧殼聚糖質量規格：羧基化度80%,粘度10mPa.s~80mpa.s(cps);氧羧Carboxymethyl chitosan

SNU-739人肝癌細胞 SNU-739 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS依諾肝素鈉質量規格：BR，細胞培養級；Anti-factor Xa activity(dried substance)：90.0~125.0IU/mg；Anti-factor Ⅱa activity(dried substance) ：20.0~35.0IU/mg。符合USP35標準Enoxaparin
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。