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禽類肉瘤病毒PCR檢測試劑盒說明書

簡要描述:禽類肉瘤病毒PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關產品:大鼠關節軟骨細胞*培養基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

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  • 產品型號:50次
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-16
  • 訪  問  量:376

詳細介紹

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 禽類肉瘤病毒PCR檢測試劑盒說明書

 Avian Sarcoma Virus(ASV)RTPCR

BK-P8832

原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

脫氧膽酸(牛或兔)/去氧膽酸/3α,12α-二羥-5β-膽烷酸/Deoxycholic acidBR,99%,10/100/500克國產/進口

牛津瓊脂基礎 規格: 100g 用途: 用于單核增生李斯特氏菌的選擇性分離(SN0184-2005)。

酸球菌 Lactococcus lactis中慢生華癸瘤菌 Mesorhizobium huakuii

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桿菌屬 Lactobacillus sp.豌豆瘤菌 Rhizobium leguminosarum

NIH3T3全細胞裂解大豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

禽類肉瘤病毒PCR檢測試劑盒說明書對甲氧偶氮  212.25  On methoxyazobenzene*:2396-60-3分子量: C13H12N2O

407有機載體  407 organic carrier  分子量:*:

2-氯-4-氟甲  144.57  2- -4- fluoride*:452-73-3分子量: C7H6ClF

4-咪唑  151.21  Imidazole 4- piperidine*:147081-85-4分子量: C8H13N3

[1,3-雙(2,6-二異丙)咪唑-2-亞]銅(I)  487.59  氯[ 1,3 -雙(2,6-二異丙)咪唑- 2 -亞]銅(我)*:578743-87-0分子量: C27H36ClCuN2

環己  160.26  Cyclohexyl benzene*:827-52-1分子量: C6H5C6H11

3-(三氟甲)吡  147.1  3- (three f) pyridine*:3796-23-4分子量: C6H4F3N

百部提取物  Hundreds of extracts  分子量:*:

環己氯鎂  Cyclohexyl chloride  142.91分子量: C6H11ClMg*:931-51-1

氘代芘  Deuterium substituted pyrene  212.31分子量: C16D10*:1718-52-1

精吡氟禾草靈  Fluazifop-p-butyl  383.36分子量: C19H20F3NO4*:79241-46-6

技術原理:
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
       發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

 

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